Термотолерантные бактерии-деструкторы углеводородов нефти

Цель: исследование особенностей деструкции углеводородов нефти термотолерантными бактериями, физиологических и метаболических свойств этих бактерий, разработка консорциума штаммов, способного эффективно деградировать нефть при температурах до 50°С в засоленных водных системах и грунтах с низкой влажностью (10%). Составлена коллекция термотолерантных нефтеокисляющих штаммов, принадлежащих к родам Gordonia, Rhodococcus, Deinococcus и Bacillus. Все штаммы были способны утилизировать нефть при температурах до 50°С, в том числе в присутствии NaCl в среде культивирования. Впервые выделен штамм G. amicalis, утилизирующий углеводороды при температурах выше 40°С.Оценена деградативная активность термотолерантных культур, определены наиболее эффективные штаммы: Gordonia sp. 1D, Rhodococcus erythropolis Par7, R. pyridinivorans L5A-BSU, Deinococcus sp. A2-6, Gordonia sp. 1G, Rhodococcus sp. Par6. Из отобранных штаммов составлено 4 различных консорциума. Выявлено, что наиболее активно процесс деструкции протекал в системе с консорциумом В, включающим Rhodococcus erythropolis Par7, R. pyridinivorans L5A-BSU и Gordonia sp. 1D (69% нефти при 24°С и 40% нефти при 45°С за вычетом абиотической убыли). Консорциум в грунте оставался стабильным и утилизировал нефть в большей степени, чем каждый из штаммов в монокультуре. Таким образом, использование этих штаммов совместно в составе консорциума значительно повышает эффективность деструкции нефти как в жидкой минеральной среде, так и в грунте. Проанализированы последовательности фрагментов генов алкан гидроксилаз alkB и CYP153 в штамме Gordonia sp. 1D. Отсутствие изменений в спектрах окисляемых штаммом субстратов позволяет предположить, что оба фермента активны как при умеренных, так и при повышенных (45-50°С) температурах.Гены деструкции нафталина nar в штамме R. pyridinivorans L5A-BSU предположительно находятся в составе мобильного генетического элемента в хромосоме штамма. Осуществлен перенос МГЭ в штамм R. erythropolis Par7, получены Nah+ рекомбинанты. Штаммы консорциума депонированы в ВКМ и получили следующие номера: Gordonia sp. 1D - ВКМ Ас2720D, Rhodococcus erythropolis Par7 – ВКМ Ас2722D, R. pyridinivorans L5A-BSU - ВКМ Ас2721D. Подана заявка на патент РФ №2015143402 «Консорциум термотолерантных бактериальных штаммов для деградации нефти и нефтепродуктов в грунтах и водах в условиях жаркого климата». Приоритет от 13.10.2015 г.