Разработка фагового препарата бактерий Xanthomonas campestris и область его практического применения

Бактериальные болезни растений являются важной причиной потери урожая в сельском хозяйстве, поскольку в настоящее время нет эффективных средств борьбы с ними. Сосудистый бактериоз крестоцветных, вызываемый бактериями Xanthomonas campestris pv. campestris, поражает практически все известные растения, относящиеся к семейству Крестоцветные. В частности, это относится к роду Капустные (Brassicaceae). Стандартные методы борьбы с данным заболеванием, к которым относят использование семенного материала хорошего качества, севооборот, выращивание менее восприимчивых к болезни сортов, не способны обеспечить полную защиту растений от бактериальных заболеваний, особенно когда погодные условия благоприятствуют распространению возбудителя. Применение фаговых биопрепаратов в различных методиках (в том числе реакция нарастания титра фага) позволяет осуществлять контроль и анализировать количественный и качественный состав выделяемых бактерий, что в отличие от классических бактериологических методов занимает значительно меньше времени. Фагодиагностика как один из методов индикации и идентификации позволяет быстро и точно определить принадлежность исследуемой бактерии не только к определенному роду, но и к виду и даже фаговару. Целью исследования являлась разработка биотехнологических параметров изготовления биопрепарата на основе выделенных и изученных бактериофагов Xanthomonas campestris pv. campestris и определение области его практического применения. Выделено и идентифицировано 13 штаммов Xanthomonas campestris pv. campestris при исследовании 54 образцов почвы, полученных с полей и фермерских хозяйств и 91 образца капусты с признаками поражения бактериозом. Выделено и селекционировано 10 изолятов бактериофагов Xanthomonas campestris pv. campestris. Все выделенные бактериофаги являются активными по отношению к бактериям Xanthomonas campestris pv. campestris. Сконструирован биопрепарат на основе бактериофага Кл34-УлГАУ, индикаторный штамм - Xanthomonas campestris pv. campestris Хс2. Данный бактериофаг имеет высокий титр литической активности (2,6х108 БОЕ/мл) и максимально широкий, из изученных бактериофагов, спектр литического действия – 96,9%. Разработана технология изготовления фагового биопрепарата Xanthomonas campestris pv. campestris. Создана схема ускоренной индикации бактерий Xanthomonas campestris pv. campestris в объектах окружающей среды методом реакции нарастания титра фага с использованием биопрепарата на основе бактериофагов Кл34-УлГАУ, которая позволяет обнаружить бактерии в объектах окружающей среды при концентрации 104 м.к./мл в течение 49 часов. Разработан экспресс-метод выделения и идентификации с использованием разработанного фагового биопрепарата.