Отчет об исследованиях (выполнении работ) по теме Разработка методов биоимиджинга in vivo на основе новых пар люциферин-люцифераза (промежуточный) Этап 1 Предварительные исследования

Объекты исследования: люциферин-люциферазные системы и методы их применения для исследований и разработок в области биомедицины. Цели: создание передовых биореагентов и методов их применения для молекулярного имиджинга, а также скрининговых и диагностических исследований в широком спектре областей биотехнологии; изучение новых люциферин-люциферазных систем и оптимизация их компонентов (ферментов и субстратов) для создания на их основе люминесцентных зондов и сенсоров для детекции биологически активных молекул, изучения их функций на клеточном и организменном уровнях, а также новых методов биоимиджинга и высокопроизводительного скрининга. Решаемые задачи: выделить, охарактеризовать и адаптировать для применения новую пару фермент-субстрат морских полихет Odontosyllis, адаптировать для применения биолюминесцентную систему базидиомицетов. Предполагается: клонировать новую люциферазу многощетинкового червя Odontosyllis и изучить механизм ферментативной люминесцентной реакции с ее участием, а также получить синтетический люциферин Odontosyllis и его структурные аналоги. Будут разработаны новые BRET-пары с участием новых люцифераз, в частности, базидиомицетов, и GFP-подобных флюоресцентных белков различных цветов. Планируется также: провести оптимизацию экспрессии соответствующих генетических конструкций в клетках млекопитающих, разработать клеточные модели высокопроизводительного скрининга на их основе, создать векторы для использования новых люцифераз в качестве репортеров генной экспрессии. Область применения: исследования в области биохимии и клеточной биологии, разработка лекарственных средств.