РАЗРАБОТКА НОВОЙ БИОМЕДИЦИНСКОЙ ТЕХНОЛОГИИ ЛЕЧЕНИЯ ТРАВМЫ ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ НЕРВОВ, ОСНОВАННОЙ НА ИСПОЛЬЗОВАНИИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА

Объект исследования: нейроны и нейральные стволовые клетки, полученные методом направленной дифференцировки из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека. Цель: разработать технологию лечения травм периферических нервов при помощи клеточных трансплантаций нейронов и нейральных стволовых клеток, выращенных в условиях in vitro. Отработаны методы культивирования индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека и их дифференцировки в нейральных направлениях. Получены культуры зрелых нейронов человека, содержащих небольшой процент глиальных клеток. Компетентность дифференцировки проверена иммуноцитохимическим окрашиванием на нейрональные маркеры SYN, SYP, NCAM, b3TUB, MAPT. Отработаны методы культивирования нейральных стволовых клеток в виде нейросфер. Разработаны протокол оценки направления роста аксонов нейронов из прикрепленных нейросфер, экспериментальная установка электростимуляции нейронов по предложенному дизайну. Проведены эксперименты по изучению влияния различных режимов электростимуляции на характер и направление роста аксонов нейронов человека. Подобран оптимальный режим электростимуляции нейронов, который позволяет не ингибировать рост аксонов и миграции нейробластов из нейросфер. Получены результаты, показывающие, что импульсный ток частотой 50 Гц и амплитудой 220 мВ/мм вызывает стимуляцию роста аксонов в катодном направлении, при этом угнетая рост аксонов в анодном направлении. Получена база для дальнейшего создания клеточных трансплантатов с направленной ориентацией нервных волокон для лечения травм периферических нервов.