Разработка терапевтических вакцин на основе онколитических вирусов для персонифицированной терапии отдельных форм злокачественных новообразований

Вирусный онколиз является перспективным подходом к терапии злокачественных заболеваний, в том числе - метастатических форм рака. Онколитические вирусы способны избирательно уничтожать опухолевые клетки, в том числе стволовые клетки, и стимулировать противоопухолевый иммунитет. Описаны случаи полного выздоровления пациентов после экспериментальной терапии глиобластом онколитическими вирусами, что указывает на перспективность и актуальность разработки и совершенствования вирусной терапии злокачественных опухолей головного мозга. Однако при использовании единичных вирусных штаммов терапевтический эффект наблюдается только у части пациентов, что обусловлено индивидуальными различиями опухолей. Планируемая работа предполагает использование панелей онколитических вирусов, обладающих различающимся тропизмом в отношении опухолей пациентов, а также разработку подхода для выявления предсказательных биомаркеров глиобластом с целью подбора наиболее подходящих терапевтических штаммов. Работа также будет включать отработку технологии получения и наработку четырех вирусных препаратов в количествах достаточных для проведения первой фазы клинических испытаний. Цели: 1. Разработка панели штаммов природных непатогенных онколитических вирусов обладающих перекрывающимися спектрами воздействия на клетки глиобластом человека. 2. Идентификация предсказательных экспрессионных биомаркеров глиобластом, позволяющих проводить персонифицированный подбор наиболее эффективных штаммов онколитических вирусов. 3. Доклинические испытания препаратов онколитических вирусов полученных из разработанной панели штаммов. Задачи: 1 Получить панель мутантных линий клеток, каждая из которых имеет делецию одного из клеточных рецепторов, используемых семейством энтеровирусов. 2. Испытать чувствительность клеток из полученной панели к имеющейся коллекции непатогенных энтеровирусов и отобрать несколько (4-6) штаммов, использующих альтернативные пути проникновения в клетки.3. Разработать технологию и произвести препараты 4 штаммов онколитических вирусов пригодные для проведения клинических испытаний первой фазы.4. Испытание дифференциальной чувствительности линий клеток глиобластом к панели вирусов. 5. Секвенирование транскриптомы 12 линий клеток глиобластом для выявления их экспрессионного профиля.6. Установить корреляции между экспрессией генов и чувствительностью к вирусам.7. Провести валидацию четырех наиболее вероятных потенциальных биомаркеров путем генных делеций в чувствительных культурах и испытания влияния на вирусную репликацию.