СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕТЕРОГЕННОГО БИОКАТАЛИЗАТОРА НА ОСНОВЕ ЛИПАЗЫ, ИММОБИЛИЗОВАННОЙ НА КАТИОНООБМЕННЫХ СМОЛАХ КУ-2-8 В Н-ФОРМЕ

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ получения гетерогенного биокатализатора на основе липазы, иммобилизованной на катионообменных смолах, включающий адсорбционную иммобилизацию липазы в буферном растворе на матрицу катионообменника в процессе инкубации при комнатной температуре с периодическим перемешиванием, отделение внешнего раствора от иммобилизованной липазы на катионообменнике, промывку образовавшегося биокатализатора буфером; при этом перед иммобилизацией катионообменник в Н-форме выдерживают в течение 12 ч при комнатной температуре в буфере, из расчета на 1 г катионообменника используют 20 мл буфера, иммобилизацию ведут путем добавления к суспензии катионообменной смолы КУ-2-8 в буфере 10 мл раствора липазы из поджелудочной железы свиньи в буфере в концентрации липазы 1 мг/мл, в качестве буферного раствора для иммобилизации используют 0,05М фосфатный буфер с рН 5,8, после чего осуществляют инкубацию при перемешивании с помощью электрической мешалки со скоростью 250 об/мин в течение 1,5 ч, затем отделение внешнего раствора от иммобилизованной липазы на катионообменнике проводят путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение 5 мин и декантации внешнего раствора; промывку образовавшегося биокатализатора осуществляют с помощью диализа с использованием целлофанового мешочка Spectra/Por 6 Standard RC, шириной 34 мм, вместимостью 3,7 мл на 1 см длины, с диаметром пор 25 кДа против 0,2М фосфатно-цитратного буфера, рН 6,5, из расчета, что для промывки 1 г полученного биокатализатора используют 400 мл 0,2М фосфатно-цитратного буфера с рН 6,5, диализ ведут в течение 8 часов, после чего буфер меняют на порцию буфера в объеме 400 мл и продолжают диализ еще в течение 16 часов до отсутствия в промывном растворе свободной липазы.