Влияние олигосахаридов и полисахаридов, блокирующих функции лектина LecA, и рекомбинантных ферментов лизостафина и дисперсина B на биоплёнки возбудителей оппортунистических инфекций

Впервые показано, что растительные олигосахариды вербаскоза, галактозил-маннотриоза и дигалактозил-маннопентаоза, а также полисахарид галактан, способны взаимодействовать с лектином LecA P. aeruginosa. За счет мультивалентного эффекта аффинность дигалактозил-маннопентаозы к LecA оказалась выше аффинности всех описанных в литературе олигосахаридов. Отработан новый вариант методики культивации биоплёнок P. aeruginosa, в котором биоплёнки выращиваются на полипропиленовых купонах, помещённых в лунки 96-луночного планшета в вертикальной ориентации. Впервые исследовано воздействие галактана на биоплёнки P. aeruginosa. Показано, что при использовании в определённом диапазоне концентраций, галактан способен ингибировать образование биоплёнок P. aeruginosa, при этом не оказывая негативного влияния на планктонный рост бактерий, то есть обладает специфическим антибиоплёночным эффектом. Использование галактана в меньших концентрациях, напротив, приводит к стимулированию образования биоплёнки. Такой эффект не наблюдался ранее для соединений – лигандов LecA, и продемонстрирован в данной работе впервые. Кроме того, на примере галактана впервые показана способность полисахарида, не являющегося нормальным компонентом матрикса биоплёнок, снижать эффективность антибиотиков в отношении клеток в составе биоплёнки. Впервые получен слитный белок, состоящий из антибактериального лизина (лизостафина) и гликозидгидролазы, расщепляющей полисахариды матрикса биоплёнок (дисперсина B). Показана более высокая эффективность такого белка в отношении биоплёнок S. aureus по сравнению с простой смесью исходных белков несмотря на сниженную бактериолитическую активность слитного белка по сравнению с нативным лизостафином. Полученные данные могут быть использованы при разработке средств для борьбы с биоплёнками на основе белков-ферментов