Разработка микрофлюидных клеточных биочипов для неинвазивного скрининга социально значимых заболеваний, в том числе онкологических

Разработанные технологии будут использованы для создания тест-системы in vitro как медицинского изделия, применяемого в клинической практике для выявления и профилактики социально значимых заболеваний по выдыхаемому воздуху. Биологические сенсоры, базирующиеся на системе [одорант/вещество ↔ рецептор одоранта ↔ внутриклеточные каскады], будут иметь очень высокий потенциал специфичности и чувствительности к целевым веществам. В качестве потенциальных биомаркеров будут предложены некоторые летучие органические соединения, которые присутствуют в патологически изменённых тканях в более высоких количествах по сравнению со здоровыми тканями или имеют характерные особенности. Выполнимость данного проекта основана на наличии опыта у участников Проекта в детекции ЛОС помощью экспрессирующих обонятельные рецепторы к целевому биомаркеру клеток линии НЕК293Т, который лежит в основе предлагаемого проекта. Задачи. Разработка многоканального биочипа, представляющего собой микрофлюидный чип с микроканалами из полидиметилсилоксана (ПДМС); 2) Создание технологии определения газообразных биомаркеров заболеваний в выдыхаемом воздухе с использованием модифицированных клеточных линий (тестирование клеточных линий НЕК293, Cos, CHO, HeLa для нахождения оптимальной культуры для дальнейшей трансфекции разработанными плазмидными векторами; выделение профиля летучих органических соединений (ЛОС) методом фамилизации рецепторов, выделения целевой мРНК и разработки плазмидных векторов, несущих гены к рецепторам биомаркеров; культивирование и последующая трансфекция клеточной культуры разработанными плазмидными векторами, несущими гены к рецепторам биомаркеров 3. Создание технологии выявления циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) с использованием многоканального биочипа для захвата циркулирующих опухолевых клеток из крови пациентов (тестирование антител к молекулам адгезии эпителиальных клеток, выявление антител с наибольшей специфичностью к молекуле адгезии эпителиальных клеток; адаптация системы подачи жидкости в чип для возможности работы с пробами крови пациентов; иммуноцитохимия захваченных в микрофлюидном чипе циркулирующих опухолевых клеток, определение их типа; распознавание наличия циркулирующих опухолевых клеток в крови пациентов, определение типа рака на основе иммуноцитохимии клеток с применением методов машинного обучения). 4) Создание курса ДПО в области клеточной инженерии, (72 часа) (русс/англ)